[发明专利]利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法有效
| 申请号： | 201310455457.7 | 申请日： | 2013-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN103614355A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 高兆建;陈宏伟;张桂英;孙会刚;王东星;于洋;杜永凯 | 申请（专利权）人： | 徐州工程学院 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12R1/125 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 楼然 |
| 地址： | 221000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)F69作为β-半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震荡法发酵制备发酵液或者发酵罐通风发酵法制备发酵液、再经β-半乳糖苷酶酶制剂制备，而得到β-半乳糖苷酶酶制剂成品。本发明生产的β-半乳糖苷酶耐热性好，即80℃保温60min、残余酶活达85％；酶活性高，即发酵液酶活达216U/ml；酶回收率高，即总酶活回收率大于80%、酶冻干粉酶活力单位达到2512U/g；且操作工艺简单、生产效率高和生产成本低，适合于大批量生产。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 枯草 芽孢 杆菌 液体 发酵 制备 半乳糖 酶制剂 方法 | ||
【主权项】：
一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β‑半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) F69作为β‑半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震荡法发酵制备发酵液或者发酵罐通风发酵法制备发酵液、再经β‑半乳糖苷酶酶制剂制备，而得到β‑半乳糖苷酶酶制剂成品，具体步骤如下：所述的摇瓶震荡法发酵制备发酵液：包括⑴菌种活化、⑵种子液制备和⑶摇瓶液体发酵；所述的发酵罐通风发酵法制备发酵液：包括⑴菌种活化、⑵一级种子液制备、⑶二级种子液制备和⑷发酵罐气升式发酵；所述的β‑半乳糖苷酶酶制剂制备：包括⑴发酵液分段超滤、⑵发酵液硫酸铵盐析、⑶透析、⑷超滤浓缩、⑸添加保护剂、⑹粗酶冷冻干燥和⑺固体粗酶粉碎。
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