[发明专利]一种基于竞争杂交反应同时检测多种miRNA序列的比色方法

摘要

本发明公开了一种基于竞争杂交反应同时检测多种miRNA序列的比色方法，该方法是将氨基修饰的DNA组装在微孔板表面，然后将微孔封闭；生物素修饰的miRNA和靶点miRNA序列在微孔表面与固定的DNA探针发生竞争杂交反应；最后将亲和素标记的多聚辣根过氧化物酶衍生到微孔表面，多聚辣根过氧化物酶催化TMB和过氧化氢的显色反应。通过测定有色溶液的吸光度从而对靶点miRNA序列进行测定。该方法简单、快速、灵敏度高、选择性好，无需对实际样品进行标记，可直接用于多种miRNA序列的检测。

主权项

一种基于竞争杂交反应同时检测多种miRNA序列的比色方法，其特征在于，将多种氨基修饰的DNA序列分别组装到微孔板上，将微孔封闭；随后将与微孔中氨基修饰的DNA序列相匹配的生物素修饰的miRNA溶液和待测靶点miRNA序列溶液混合滴加在孔板表面并发生竞争杂交反应；最后将亲和素标记的多聚辣根过氧化物酶衍生到微孔表面，多聚辣根过氧化物酶催化过氧化氢氧化TMB的显色反应，从而对靶点miRNA序列定量。