[发明专利]一种利用降解处理四环素后的菌渣生产酵母浸膏的方法

摘要

本发明公开了一种利用降解处理四环素后的菌渣生产酵母浸膏的方法，属于微生物发酵技术领域。它包括：酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子的制备，黑曲霉种子的制备，菌渣培养基制备和酵母浸膏的制备几个步骤，其中酵母浸膏的制备是将制备好的几种菌进行接种培养，然后再按质量百分比为0.03％的量加入酵母抽提酶，水解16-24h，升温到80℃使酶失活，待其冷却后，4000r／min离心10min，滤液经减压浓缩控制其水分为15-20％，即为酵母浸膏。该方法生产成本低、制备工艺简单独特、生产周期短，并且可使四环素菌渣得以高值转化。

主权项

一种利用降解处理四环素后的菌渣生产酵母浸膏的方法，其特征在于：包括如下步骤：S1：酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子的制备：a.种子活化培养：分别从酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露保存管中挑取一环，分别接入种子活化扩大培养基中，30～35℃，100～140r／min下好氧培养36～48h，可分别得到活化的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子；所述种子浓度为107CFU／mL；b.一级种子制备：将上述步骤a制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露种子按质量百分比为1‑5％的接种量，分别接种于种子活化扩大培养基中，30～35℃，100～140r／min下好氧培养36～48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子；c.二级种子制备：将上述步骤b制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露一级种子按质量百分比为1～5％的接种量，分别接种于种子活化扩大培养基中，30～35℃，100～140r／min下好氧培养36～48h，可分别得到酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子。S2：黑曲霉种子的制备：(1)黑曲霉活化培养：从黑曲霉保存管中挑取一环，在霉菌活化培养基制备的斜面上划上斜线，在温度30～35℃、湿度75～80％下好氧培养60～72h，可得到黑曲霉斜面孢子；(2)黑曲霉扩大培养：将上述步骤(1)得到的黑曲霉斜面管中的孢子用pH7.0的磷酸盐缓冲溶液洗下，取孢子悬液按质量百分比为1～5％的接种量，接种于霉菌扩大培养基中，在温度30～35℃、湿度75～80％下好氧培养 96～120h，可得到黑曲霉种子。S3：菌渣培养基制备：按下述重量比的原料混合即可得菌渣培养基：水分含量为80～85％的降解处理四环素后的菌渣100kg，玉米淀粉1.4kg，硫酸铵0.6kg，葡萄糖0.5kg，充分混合；水分含量为80～85％的降解处理四环素后的菌渣的制备方法如下：取四环素新鲜菌渣100kg，121℃湿热灭菌20～30min；然后加入质量百分比为1％的有效氯为10％的次氯酸钠溶液，充分搅拌1h；再加入草酸，充分搅拌30min；所述次氯酸钠与草酸的摩尔比为1：1，最后将水分含量调节为80‑85％。S4：酵母浸膏的制备：将上述步骤S1c中制备的酿酒酵母、热带假丝酵母和EM原露二级种子以及步骤S2(2)中制备的黑曲霉种子，分别按质量百分比为1～10％接种量接入上述步骤S3制备的菌渣培养基中，30～35℃，40～80r／min下好氧培养3～5d，然后调节pH为6.0‑7.0，在55℃水浴中按质量百分比为0.03％的量加入酵母抽提酶，水解16～24h，升温到80℃使酶失活，待其冷却后，4000r／min，离心10min，滤液经减压浓缩控制其水分为15～20％，即为酵母浸膏。