[发明专利]一种快速鉴别葎草性别的分子生物学方法有效
| 申请号： | 201310548829.0 | 申请日： | 2013-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN103555845A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 高武军;李书粉;王连军;张国俊;邓传良;卢龙斗 | 申请（专利权）人： | 河南师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 453007 河南省新乡市*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速鉴别葎草性别的分子生物学方法，属于分子生物学技术领域。具体实施过程是，利用设计的特异引物序列，以葎草个体基因组DNA为模板进行PCR扩增，反应体系为25μL，反应组成为1U的TaqDNA聚合酶，2μL的dNTP，100-200ng的基因组DNA，在PCR仪上进行PCR扩增，扩增产物以1.5％琼脂糖凝胶电泳分离，溴化乙锭染色，在凝胶成像系统下观察并拍照记录，DL2000marker作分子量标记，出现大小为153bp目的带的是雄性个体，没有条带的即为雌性个体。本发明中所述的SCAR引物用于预测葎草的性别，为鉴定葎草性别提供简便稳定的分子标记，在生产方面和人类健康方面具有重要应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴别 性别 分子生物学 方法 | ||
【主权项】：
一种快速鉴别葎草性别的分子生物学方法，其特征在于：包括葎草雄性特异性引物序列，其特异性引物序列为：上游(SCARF)：5’‑TTGAAGAAATCTCATCCTCAAAGA‑3’；下游(SCAP R)：5’‑GACCTTGGCCACAGGAATAG‑3’；该方法的具体实施过程为：利用上述设计的特异引物序列，以葎草个体基因组DNA为模板进行PCR扩增，反应体系为25μL，反应组成为1U的Taq DNA聚合酶，2μL的dNTP，100‑200ng的基因组DNA，其中含雄性特异上下游引物各0.1μmol/L，在PCR仪上按下面的循环参数进行PCR扩增：95℃预变性5min后，95℃变性30sec，60℃退火30sec，72℃延伸60sec，共30个循环，最后72℃延伸7min，扩增产物以1.5％琼脂糖凝胶电泳分离，溴化乙锭染色，在凝胶成像系统下观察并拍照记录，DL2000marker作分子量标记，出现大小为153bp目的带的是雄性个体，没有条带的即为雌性个体。
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