[发明专利]高通量快速测定稻米中表观直链淀粉含量的方法

摘要

本发明公开了一种高通量快速测定稻米中表观直链淀粉含量的方法。具体操作步骤如下：1）样品的制备及处理；2)样品置于2ml微量离心管称量；3）金属浴糊化样品；4）样品直链淀粉的测定。与碘比色法相比，本发明大大简化了前期的样品预处理步骤，在测定过程中改用2ml的离心管替代50ml容量瓶，用金属浴代替水浴，使淀粉糊化更彻底，实验更易操作，可缩短实验周期，增加每日测定的批次和样品数。尤其适用于高通量的诱变群体中突变体的筛选。如果需要筛选的突变体与亲本之间的直链淀粉含量差异超过5%，不用测定光吸收值用肉眼即可鉴定差异。

主权项

一种高通量快速测定稻米中表观直链淀粉含量的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：1)样品的制备及处理：测定前样品置于65℃烘箱4小时以上或37℃烘箱过夜；2)样品置于2ml微量离心管称量：用美国丹佛TP‑214万分之一天平称取实验样品10mg置于2ml微量离心管中，样品糊化前加20ul无水乙醇，轻轻拍打离心管，确保样品充分浸润；3)金属浴糊化样品：接着步骤2）加入360ul1N NaOH,将样品置于95‑100℃金属浴加热10‑20分钟，中间轻轻拍打数次，确保样品充分糊化；4)样品直链淀粉的测定：接着步骤3）将样品定容至2ml；再取其中的200ul糊化后的样品置于新的2ml微量离心管，加36ul1N HAC中和；加水稀释；加20ul0.2%I2‑KI染液，充分混匀，加水定容至2ml，用分光光度计测定OD620。