[发明专利]葡萄糖氧化酶的分离纯化方法有效
申请号: | 201310571963.2 | 申请日: | 2013-11-15 |
公开(公告)号: | CN103555682A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 唐云明;王洁;李星;王红扬;方玲;孙才云 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04 |
代理公司: | 重庆华科专利事务所 50123 | 代理人: | 康海燕 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明属于酶工程技术领域,具体涉及葡萄糖氧化酶的分离纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种高效分离纯化葡萄糖氧化酶的方法。本发明的技术方案是葡萄糖氧化酶的分离纯化方法,包括如下步骤:a、粗酶液的制备;b、DEAE-Sepharose离子交换层析;c、Superdex-200凝胶过滤层析。本发明方法可高效率的分离纯化葡萄糖氧化酶。 | ||
搜索关键词: | 葡萄糖 氧化酶 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
葡萄糖氧化酶的分离纯化方法,其特征在于:包括如下步骤:a、粗酶液的制备:将菌丝研磨,抽提,盐析,得粗酶液;所述的菌丝为收集的产葡萄糖氧化酶的丝状真菌的菌丝;b、DEAE‑Sepharose离子交换层析:用0.05mol/L pH7.1的Tris‑HCl缓冲溶液平衡DEAE‑Sepharose离子交换层析柱,将步骤a得到的粗酶液上样,洗脱,收集具有GOD酶活性的洗脱液,透析脱盐,冷冻干燥;c、Superdex‑200凝胶过滤层析:用1个床体积的0.05mol/L pH7.1的Tris‑HCl缓冲溶液平衡Superdex‑200凝胶过滤层析柱,将步骤b得到的样品溶解后上样,洗脱,收集具有GOD酶活性的洗脱液,透析脱盐,冷冻干燥得到GOD纯品。
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