[发明专利]一种直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂的制备方法，包括以下制备步骤：1）木葡萄糖酸醋杆菌菌泥；2）制备菌悬液；3）制备保护剂；4）菌悬液与保护剂混均；5）冷冻干燥；本发明直投式木葡萄酸醋杆菌发酵剂为干粉，水分活度在1%～3%，在4℃可保存3个月，在-20℃可保存18个月。本发明方法中以木葡萄糖酸醋杆菌的产物NATA为载体添加了脱脂乳、谷氨酸等为保护剂，同时NATA为多糖类，将木葡萄糖酸醋杆菌包裹着，具有很好的保护作用。另外，以木葡萄糖酸醋杆菌产物为载体作为保护剂，最后碾碎成粉状，可以节约成本。

主权项

一种直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂的制备方法，其特征在于包括以下制备步骤：1）木葡萄糖酸醋杆菌菌泥a、将先选育产细菌纤维素能力强的木葡萄糖醋酸杆菌，在120℃～130℃灭菌20～30分钟后的活化培养基上活化接种；活化温度20℃～60℃，活化时间24～62小时；b、挑选单菌落在120℃～130℃灭菌20～30分钟后的种子培养基中扩大细胞培养，培养温度20℃～60℃，培养时间24～62小时；获得木葡萄糖酸醋杆菌液体菌种；c、将木葡萄糖酸醋杆菌液体菌种在4℃～8℃，以1000g～8000g离心速率，离心10～30分钟,收集细胞，获得木葡萄糖酸醋杆菌菌泥；2）制备菌悬液将步骤1）获得的木葡萄糖酸醋杆菌菌泥用0.01～0.5mol/L，pH6.5～pH7.5的PBS缓冲液制备成菌悬液；3）制备保护剂将脱脂奶粉、海藻糖，蔗糖，乳糖，谷氨酸，甘氨酸，明胶，甘露醇分别用PBS缓冲液调制；脱脂奶粉、海藻糖，蔗糖，乳糖，谷氨酸，甘氨酸，明胶，甘露醇与PBS缓冲液的重量体积比分别为5～40%，5～20%，5～20%，5～20%，1～5%，1～5%，5～10%，1～5%；调制后获得以下八种保护剂：脱脂乳5～40%，海藻糖5～20%，蔗糖5～20%，乳糖5～20%，谷氨酸1～5%，甘氨酸1～5%，明胶5～10%，甘露醇1～5%；4）菌悬液与保护剂混均a、将步骤2）的菌悬液与步骤3）的保护剂以1：2～5的体积比混匀，获得菌悬液与保护剂的混合物；所述保护剂为脱脂乳5～40%，海藻糖5～20%，蔗糖5～20%，乳糖5～20%，谷氨酸1～5%，甘氨酸1～5%，明胶5～10%，甘露醇 1～5%的一种或几种混合；b、将菌悬液与保护剂的混合物放4℃～5℃冰箱1～2小时；5）冷冻干燥a、将步骤4）获得的菌悬液与保护剂的混合物放‑18～‑55℃低温冰箱冷冻2～12小时直至完全冻结;获得木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂样品；b、将木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂样品用冻干机冷冻干燥，真空度为0.2MPa以下，干燥时间24～48小时，获得直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂。