[发明专利]一种利那洛肽的制备方法

摘要

本发明属于药物合成技术领域，公开了一种采用完全选择性形成三对二硫键合成利那洛肽的方法。使用本发明的工艺，可以在同一个溶液体系中，依次完成利那洛肽中三对二硫键的形成，因此该工艺的操作方法相当简单，同时也大大提高利那洛肽最终精肽的收率，并且可以实现大规模生产。

主权项

一种利那洛肽的制备方法，包括如下步骤：1)Fmoc‑Tyr(tBu)‑树脂的制备：Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH和载体树脂反应，获得Fmoc‑Tyr(tBu)‑树脂；2)利那洛肽肽树脂的制备：Fmoc‑Tyr(tBu)‑树脂采用逐一偶联的方式偶联Fmoc保护基团的其他氨基酸，获得利那洛肽肽树脂，其中1‑6位的Cys侧链采用Hqm保护，2‑10位的Cys侧链采用Trt保护，5‑13位的Cys侧链采用Acm保护；3)利那洛肽线性肽粗肽的制备：利那洛肽肽树脂经裂解反应，获得带有Acm保护基团及Hqm保护基团的线性肽粗肽，裂解试剂为三氟乙酸TFA、三异丙基硅烷TIS、1,2‑乙二硫醇EDT、苯酚PhOH和水组成的混合试剂，混合试剂中各组分的体积比为TFA:TIS:EDT:PhOH:H2O＝85‑95:2‑5:0‑3:0‑2:1‑5，裂解时间为1.5‑3.5小时；4)利那洛肽2‑10位第一对二硫键的形成：采用带Acm和Hqm保护基团肽的水溶液，溶液的浓度为0.1‑2mg肽/ml，往其中通入氧气进行氧化，得到2‑10位成环的第一对二硫键；5)利那洛肽Hqm保护基团的脱除及1‑6位第二对二硫键的形成：加入水溶液体积5％的水合肼，脱除Hqm保护基团的同时形成第二对二硫键；6)利那洛肽5‑13位第三对二硫键的形成：往水溶液加入相当于肽的5‑40倍当量的碘，然后加入水溶液体积20％的醋酸，形成第三对二硫键；7)纯化和冻干后获得利那洛肽精肽。