[发明专利]多肋藻配子体克隆杂交育苗技术

摘要

本发明涉及多肋藻（Costaria costata）配子体克隆杂交育苗技术，即克隆培养分离多肋藻雌、雄配子体并利用其进行杂交育苗。步骤如下：1）清洗剪切多肋藻孢子体；2）阴干使其释放游孢子；3）培养附着的游孢子；4）发育成配子体后刮下、打碎、培养；5）分离雌、雄配子体；6）打碎、克隆培养获得大量雌、雄配子体；7）将雌、雄配子体杂交育出幼孢子体；8）转移至海上暂养；9）一个月后，分苗，海上养殖，获得成熟孢子体。本发明的优点为：通过分离高纯度多肋藻雌、雄配子体，并进行克隆培养，获得大量用于育苗的雌、雄配子体种质材料，育苗时间不受季节限制，可满足未来对多肋藻的生产及科研需要。

主权项

多肋藻配子体克隆杂交育苗技术，其特征在于：可按如下步骤操作，1)用无菌海水清洗带有孢子囊的多肋藻孢子体5次，剪切10×10 cm的组织块；2)将组织块阴干处理2 h后，放入盛有无菌海水及载玻片的烧杯中，待其释放游孢子；3)显微镜下观察到游孢子附着在载玻片后，取出载玻片放入新的盛有无菌海水的烧杯中，在适宜条件下培养；4)待游孢子发育成配子体时，将其从载玻片上轻轻刮下并打碎，倒入锥形瓶中悬浮培养；5)显微镜下可以区分雌、雄配子体后，利用毛细管分离出雌、雄配子体；6)分别培养雌、雄配子体，形成肉眼可见的绒毛状，打碎、再次进行悬浮培养以获得大量雌、雄配子体；7)取雌、雄配子体按1:1比例混合，倒入放有棕绳的烧杯中培养；8)当棕绳上长出肉眼可见的小孢子体（长度约0.5‑1cm）时，转移到海上暂养；9)暂养一个月后，分苗，海上养殖5‑6个月，获得成熟的多肋藻孢子体。