[发明专利]大兴安岭野生泽漆总黄酮的制备方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生泽漆里提取总黄酮的新方法，特别是涉及一种利用超高压(离子液体作为溶剂)提取，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，高速逆流色谱分离纯化总黄酮的新方法。本发明优点1、离子液体与超高压结合，具有提取更快、更高效的优势。并且工艺简便易行，有效成分提取充分，生物碱含量高。2、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化技术，能很好的富集总生物碱，进一步纯化有效成分。树脂易处理、分离速度快、费用低，可以工业化使用。3、高速逆流色谱技术具有操作灵活、高效、分离速度快、制备量大、费用低等优点，并且可以工业化使用。本发明利用上述技术所得总黄酮含量高，纯度高达98.3％。

主权项

一种采用超高压提取技术，聚酰胺联用大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的方法，其步骤如下：（1）超高压提取：泽漆全草切断，以不同浓度离子液体溶液为溶剂，在一定料液比、适当超高压力下处理几分钟；（2）精滤处理：采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1μm，在一定温度和压力下精滤处理；（3）聚酰胺树脂吸附及洗脱：采用一定目数的聚酰胺粉末，控制上样液浓度，上样液体积,室温下以一定流速吸附饱和；解吸时先除杂，再用一定浓度的乙醇溶液解吸，控制流速,收集洗脱液，检测总黄酮含量；（4）大孔树脂二次吸附及洗脱：选用不同型号的大孔树脂，控制上样液质量浓度，上样速率；先用2 BV去离子水冲洗树脂，再用不同浓度的乙醇溶液，以一定流速洗脱，收集洗脱液，检测总黄酮含量；（5）真空冷冻干燥：收集总黄酮溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；（6）分相：称取总黄酮提取物，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜，分相平衡后分出上相和下相；（7）HSCCC纯化：以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，纯化黄酮提取物；（8）检测：采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，泽漆总黄酮纯度为95% 以上；其中，在所述的步骤（1）中，离子液体为1‑辛基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐、1‑丁基‑3‑甲基咪唑溴盐、1‑羟乙基‑3‑甲基六氟磷酸盐中的任意一种，体积浓度为50‑70%；在所述的步骤（3）中，聚酰胺树脂为80‑200目，上样液浓度控制在0.5‑1.5 mg/mL，上样液体积2‑3BV,室温下以2‑4BV/h流速吸附饱和；解析时除杂水2‑4BV，乙醇解析浓度为75‑85%，洗脱体积4‑6 BV，流速2‑4BV/h；在所述的步骤（4）中，大孔树脂为D312、DM130、D101中的任意一种；上样液质量浓度为3‑4.5mg/ml，上样速率2‑4BV/h，上样体积4‑6 BV/h；洗脱时乙醇溶液浓度为80‑90%，洗脱流速为1‑3BV/h，洗脱体积为5‑7 BV；在所述的步骤（5）中，总黄酮溶液预冻温度为‑15℃至‑25℃，工作压力20‑30Pa，升华温度50‑55℃，解析温度60‑65℃；在所述的步骤（6）中，溶剂为比例是4：1：3的乙酸乙酯‑甲醇‑水、比例是5：:3：2：4的正己烷‑醋酸乙酯‑乙醇‑水、比例是4：3：2：1的氯仿‑甲醇‑丁醇‑水中的任意一种；在所述的步骤（7）中，转速700‑850 r/min，流速为2.0‑3.0 mL/min。