[发明专利]一种微藻藻株人工选育方法

摘要

本发明涉及一种微藻藻株人工选育方法，包括微藻藻株常压室温等离子体诱变和基于吸光度与特异性染料发光强度变化的藻株筛选流程。本发明的特征是将常压室温等离子体诱变技术、基于吸光度的微藻生长测试和基于荧光染料的微藻油脂评估方法结合，相对于已有微藻藻株选育方法，具有高效、快速获得目标藻株的特点。

主权项

一种微藻藻株人工选育方法，，其特征在于：包括微藻藻株常压室温等离子体诱变和基于吸光度与特异性荧光染料荧光强度变化的藻株筛选流程，具体操作包括：(1)利用常压室温等离子体对天然藻株进行诱变：使用室温常压等离子体仪对微藻培养液进行诱变；(2)将诱变处理后的微藻涂布于固体培养基上，在选择性压力条件下或正常培养条件下进行培养，同时以未诱变处理的藻液作为对照，对于正常培养条件下，至藻落生长出后，分别对诱变和对照组进行藻落计数，以致死率=（1‑诱变藻落数/对照藻落数）×100%大于或等于90%为成功诱变的指标，对生长出诱变藻落进行96孔板培养筛选；对于选择压力下，生长出的藻落即用于96孔板培养筛选；(3)利用酶标仪或者分光光度计对孔板培养的微藻OD值进行测定，获得藻细胞生长情况；(4)利用染料对孔板中液体培养的微藻细胞进行染色，测定细胞内代谢物的积累情况；(5)以生长速度变化或代谢物含量变化情况为指标，最终确定目标藻株。