[发明专利]一种Thonningianin A单体的分离纯化方法

摘要

本发明涉及一种ThonningianinA单体的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。具体步骤为：（1）提取：将赶黄草药材切成小段，以乙醇回流提取、过滤；（2）浓缩：将滤液浓缩至20%；（3）大孔吸附树脂富集与洗脱；（4）聚酰胺树脂富集与洗脱；（5）高效制备液相色谱分离：流动相为乙腈-0.3%磷酸水溶液，检测波长254nm；（6）产品回收：将ThonningianinA单体溶液过滤析出晶体，经干燥即得到ThonningianinA单体产品。本发明操作简便，生产周期短，分离效率高，工艺稳定可靠，重现性好，成本易控制，产品纯度高，可作为含量测定的标准物质使用。

主权项

一种Thonningianin A单体的分离纯化方法，其特征在于：包括以下工艺步骤：（1）提取将赶黄草药材切成0.5cm的小段，按照药材重量：70%乙醇溶液=1Kg：6L，加入浓度为70%的乙醇溶液，回流提取3次，每次2小时，提取液过滤，收集、合并滤液;（2）浓缩将步骤（1）收集、合并的滤液回收乙醇，浓缩至原滤液体积的15‑25%；（3）大孔吸附树脂富集与洗脱将步骤（2）浓缩后的滤液过大孔吸附树脂进行吸附，先用纯化水清洗树脂至无色后，再用60%‑70%的乙醇洗脱产品，至流出液无色，收集合并洗脱液，将洗脱液减压浓缩，回收乙醇；（4）聚酰胺树脂富集与洗脱将步骤（3）浓缩后的洗脱液过聚酰胺树脂进行吸附，先用10%的乙醇清洗树脂至无色后，再用90%的乙醇洗脱产品，至流出液无色，收集合并洗脱液，将洗脱液减压浓缩，回收乙醇得解析产品浓缩液；（5）高效制备液相色谱分离色谱条件如下：填料为C18的色谱柱；流动相组成为：乙腈‑0.3%磷酸水溶液，二者体积比为45：55；检测波长为254nm；取步骤（4）浓缩液用溶剂过滤器采用0.45μm有机膜过滤，滤液进样，进行Thonningianin A单体的制备分离，紫外检测器在线监测，针对性收集Thonningianin A单体的制备馏分溶液，得Thonningianin A单体溶液；（6）产品回收将步骤（5）高效制备液相色谱分离得到的Thonningianin A单体溶液加热回收乙腈，Thonningianin A单体在水溶液中大量析出，放置室温后用漏斗过滤析出晶体，过滤固体于65℃干燥12小时，即得到Thonningianin A单体产品；步骤（1）、（3）、（4）中所述乙醇的浓度均为体积百分比。