[发明专利]一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法有效
申请号: | 201310725163.1 | 申请日: | 2013-12-25 |
公开(公告)号: | CN103733998A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 王良桂;杨秀莲;王亚莉;张春霞;凌敏 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210037 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法,包括:1)从健康茁壮的雨城丹桂树上,选取盛花期时的新鲜花梗,进行消毒处理;2)无菌条件下,将处理后的材料接种于诱导及分化培养基上,温度25±1℃,全黑暗条件下,培养至分化;其中,诱导及分化培养基为:B5+6-BA2.0~3.0mg/L+2,4-D0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH5.5;3)将已分化的愈伤组织接种于增殖培养基中,温度25±1℃,光照时间为12h/天,光照强度为2500lx,25天继代增殖一次,即可;其中,增殖培养基为:B5+6-BA3.0mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH5.5。本发明以花梗为外植体进行愈伤组织的分化及增殖培养,先经过30天的诱导培养,愈伤组织的分化率较高,达到90%;然后经过25天的继代增殖培养,愈伤组织的增殖系数较高,可以达到1.8,具有很好的实用性。 | ||
搜索关键词: | 一种 丹桂 组织 分化 增殖 方法 | ||
【主权项】:
一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法,其特征在于,包括以下步骤:1)从健康茁壮的雨城丹桂树上,选取盛花期时的新鲜花梗,进行消毒处理;2)无菌条件下,将处理后的材料接种于诱导及分化培养基上,温度25±1℃,全黑暗条件下,培养至分化;其中,诱导及分化培养基为:B5+6‑BA2.0~3.0mg/L+2,4‑D0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH5.5;3)将已分化的愈伤组织接种于增殖培养基中,温度25±1℃,光照时间为12h/天,光照强度为2500lx,25天继代增殖一次,即可;其中,增殖培养基为:B5+6‑BA3.0mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH 5.5。
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