[发明专利]参芪降糖制剂HPLC标准指纹图谱及其构建方法

摘要

本发明公开了参芪降糖制剂HPLC标准指纹图谱及其构建方法，该构建方法，包括供试品溶液和对照品溶液的制备，采用线性梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为0.1%(v/v)磷酸水溶液，检测波长为203nm，柱温为25~35℃，流速为0.8~1.2mL/min，以高效液相色谱法进行测定，得参芪降糖制剂指纹图谱，以至少10批指纹图谱的共有特征峰作为标准指纹图谱的特征峰；标准指纹图谱共有38个特征峰，归属于人参茎叶皂苷、黄芪、五味子、地黄、覆盆子的特征峰分别有13、4、7、3、4个。本发明方法及标准指纹图谱能全面、准确评价参芪降糖制剂的整体质量，有利于保证参芪降糖制剂的质量及临床疗效。

主权项

1.一种参芪降糖制剂HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：1）制备参芪降糖制剂供试品溶液：粉碎参芪降糖制剂，置于带塞的锥形瓶中，加入甲醇，使参芪降糖制剂的浓度为40~60mg/mL，密塞，称定重量，超声处理30~60min，功率400W，频率40KHz，静置放冷，再称定重量，用甲醇弥补减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液，置蒸发皿中蒸干，残渣加去离子水使其溶解，去离子水的体积为滤液的0.4~0.8倍，再用去离子水饱和的正丁醇萃取3~4次，每次使用的去离子水饱和的正丁醇体积为滤液的0.6~1.0倍，合并每次萃取后的正丁醇液，置于蒸发皿中，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容，摇匀，滤过，取续滤液，即可；2）对照品溶液的制备：称取人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rd、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素，加甲醇溶解，分别制成相对应的对照品溶液； 3）参芪降糖制剂的HPLC指纹图谱的建立：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，进样，用高效液相色谱仪测定，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为乙腈，流动相B为体积百分数为0.1%的磷酸水溶液，线性梯度洗脱，洗脱程序为：检测波长为203nm，柱温为25~35℃，流速为0.8~1.2mL/min，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算供试品的相对保留时间和相对峰面积，即得到参芪降糖制剂HPLC指纹图谱；4）参芪降糖制剂HPLC 的标准指纹图谱：高效液相色谱仪测定至少10 批参芪降糖制剂样品供试品溶液的指纹图谱，并进行分析比较，得到由共有特征峰构成的指纹图谱为参芪降糖制剂HPLC 的标准指纹图谱。