[发明专利]一种转基因材料来源食用油的分子检测方法

摘要

本发明属于生物检测技术领域，具体为一种转基因材料来源食用油的分子检测方法。针对食用油脂中核酸含量低、破坏严重、DNA序列片段短的特点，本发明利用DNA提取试剂盒法加核酸富集处理步骤，有效地从食用油中提取到可用于PCR扩增反应的DNA模板，设计并筛选了几个能有效扩增DNA模板的引物，通过普通PCR技术定性检测出了大豆及玉米的内源基因tRNA,18SrRNA，以及外源调控序列CaMV35S，为食用油原料是否转基因的检验提供了一种基于PCR的稳定有效的方法。本发明的方法对于经过高温处理（烹饪）以后的食用油。

主权项

一种转基因材料来源食用油的分子检测方法，其特征在于具体步骤为：（1）用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒提取食用油中的DNA；（2）设计并筛选得到扩增tRNA基因的一个引物以及扩增18S基因的三个不同扩增长度的引物，分别为：tRNA：  SEQ.ID.NO1SEQ.ID.NO218S‑1： SEQ.ID.NO3 SEQ.ID.NO418S‑2： SEQ.ID.NO5SEQ.ID.NO618S‑3： SEQ.ID.NO7SEQ.ID.NO8（3）设计35S启动子引物：35S：   SEQ.ID.NO9   SEQ.ID.NO10（4） 从DNA提取后，所有实验均设阳性对照和空白对照；（5）用步骤（2）和步骤（3）中的引物PCR扩增步骤（1）从食用油中提取到的模板DNA；（6）将上述PCR扩增产物用1.5％琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色后鉴定是否存在扩增产物，并依此判断该食用油的原料是否为转基因或含转基因成分：若存在18S的扩增产物，则确定提取出了食用油中的DNA；若同时存在内源基因18S和外源基因35S的产物，则该食用油的原料为转基因或含转基因成分；若存在内源基因18S而不存在外源基因35S产物，则该食用油的原料为非转基因。