[发明专利]一种丙型肝炎病毒基因型检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种丙型肝炎病毒基因型检测试剂盒。该试剂盒用磁珠法提取样本核酸，采用实时荧光定量PCR技术，以HCV基因组的高度保守区域为扩增靶目标，设计特异性引物及TaqMan探针，在实时荧光PCR仪上通过PCR扩增对HCV基因进行快速、准确分型检测，体系中加入内标，可以有效预防假阴性结果。

主权项

一种丙型肝炎病毒基因型检测试剂盒，其包括3种丙型肝炎病毒PCR反应液，其中，HCV1/3型PCR反应液含有两种用于靶多核苷酸检测的探针和用于靶多核苷酸扩增的上下游引物，且所述引物和探针的序列为，上游引物HCV1‑F：5'‑AGGAAGACTTCCGAGCGGTC‑3'；下游引物HCV1‑R：5'‑TGCCATAGAGGGGCCAAGG‑3'；探针HCV1‑P：5’FAM‑TACCCGGGCTGCGCCCAGG‑BHQ13’；上游引物HCV3‑F：5'‑GTCCTTTCTTGGAACAACCCGC‑3'；下游引物HCV3‑R：5'‑GACCCAACACTACTCGGCTAGTGA‑3'；探针HCV3‑P：5’FAM‑CAATACCCAGAAATTTGGGCGTGCC‑BHQ13’；HCV2/6型PCR反应液含有两种用于靶多核苷酸检测的探针和用于靶多核苷酸扩增的上下游引物，且所述引物和探针的序列为，上游引物HCV2‑F：5'‑CGGAATTGCCGGGAAGACT‑3'；下游引物HCV2‑R：5'‑GCCTTTCGCAACCCAACG‑3'；探针HCV2‑P：5’FAM‑ATAAACCCACTCTATGCCCGGTCATTTGG‑BHQ13’；上游引物HCV6‑F：5'‑CATGGGGTACATTCCCGTCG‑3'；下游引物HCV6‑R：5'‑TTGATCCCGTCCTCGATTGC‑3'；探针HCV6‑P：5’FAM‑ACACCATGTGCGAGCGCAGCCG‑BHQ13’。HCV1b/内标型PCR反应液含有用于靶多核苷酸扩增的上游引物HCV1b‑F、下游引物HCV1b‑R及用于靶多核苷酸检测的探针HCV1b‑P，并含有用于检测内标的上游引物IC‑F、下游引物IC‑R及用于检测内标的探针IC‑P，且所述引物和探针的序列为，上游引物HCV1b‑F：5'‑ACCTCGTGGAAGGCGACAA‑3'；下游引物HCV1b‑R：5'‑CCATAGAGGGGCCAAGGGTA‑3'；探针HCV1b‑P：5’FAM‑CCAAGGCTCGCCAGCCCGAG‑BHQ13’；上游引物IC‑F：5’‑CACCACTTAAATCCTAAGGTTCCAG‑3’；下游引物IC‑R：5’‑CTGATGACATAATTGAGATTGCACC‑3’；探针IC‑P：5’HEX‑TTTTGCTGACTCACGTATTCGTAGCCAA‑BHQ13’。