[发明专利]人乳头瘤病毒病毒样颗粒的高效提纯方法有效
| 申请号： | 201380040425.9 | 申请日： | 2013-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN104507956B | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 金洪珍;金亨真 | 申请（专利权）人： | 普瓦丝株式会社 |
| 主分类号： | C07K1/16 | 分类号： | C07K1/16;C07K14/025 |
| 代理公司： | 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 | 代理人： | 王金双 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 韩国;KR |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人乳头瘤病毒（HPV）L1蛋白的高纯度和高效提纯方法。根据所述提纯方法，当利用还原剂处理细胞匀浆而形成加热/冷却的时候，所提纯的HPV L1蛋白的纯度和产率大大地提高。此外，通过所述提纯方法提纯的HPV L1蛋白的VLP具有极佳的抗原性和免疫原性。 | ||
| 搜索关键词： | 乳头 病毒 颗粒 高效 提纯 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提纯人乳头瘤病毒（HPV）L1蛋白的方法，包含：（i）培养表达HPV L1蛋白的转化的宿主细胞，收获所培养的宿主细胞并破碎所述细胞；（ii）将还原剂添加至宿主细胞的匀浆；（iii）将上述添加还原剂的宿主细胞的匀浆在25至80℃下加热10分钟至72小时后在0至10℃下冷却30分钟至3小时；和（iv）通过对加热和冷却的宿主细胞的匀浆执行第一层析来提纯HPV L1蛋白；（v）对第一层析的洗脱部分执行第二层析来清除污染物质；和（vi）将上述清除了污染物质的HPV L1蛋白质以病毒样颗粒的形态回收。
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