[发明专利]用于转化猪肺炎支原体的载体，转化的猪肺炎支原体菌株及其用途

摘要

本发明涉及猪肺炎支原体突变株，以及用于制备所述突变株的方法。其还涉及用于所述方法的载体、疫苗组合物以及包含用于针对猪地方性肺炎和其他猪疾病的所述突变株的接种试剂盒。本发明还涉及将猪肺炎支原体作为用于表达重组蛋白质和其他目的DNA序列的宿主的应用。

主权项

1.用于制备猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)突变株的方法，其特征在于，所述方法包括通过使用包含至少一个外源DNA序列的携载载体转化猪肺炎支原体菌株的步骤，所述外源DNA序列处于猪肺炎支原体的启动子区的DNA序列的控制下，其中所述猪肺炎支原体的启动子区与位于编码猪肺炎支原体蛋白的基因的5'侧的包含50个碱基对至300个碱基对的DNA片段对应，所述猪肺炎支原体蛋白选自P36, P46, P65, P76, P97, P102, P146和P216蛋白，其中所述猪肺炎支原体的启动子区起始或促进猪肺炎支原体DNA序列的转录，并且其中至少一个外源DNA序列选自：针对抗生素的抗性基因、编码重组酶的基因、编码转座酶的基因、转座酶靶序列、来自猪肺炎支原体的DNA片段、编码诱导针对疾病或病理状况的治疗性或保护性应答的微生物的抗原组分的基因；其中所述携载载体是复制型质粒载体，其包含：1)包含支原体菌株的oriC区的DNA序列，所述支原体为猪肺炎支原体，和2)外源DNA序列，其包含处于猪肺炎支原体启动子区的DNA序列的控制下的标记基因和另外的外源DNA序列；或者其中所述携载载体是转座子载体，其包含：1)编码转座酶的DNA序列，和2)包含标记基因的外源DNA序列，以及3)另外的外源DNA序列，其中所述编码转座酶的DNA序列和至少一个所述外源DNA序列处于猪肺炎支原体启动子区的DNA序列的控制下；其中所述外源DNA序列被稳定地引入猪肺炎支原体菌株的细胞质或基因组中。