[发明专利]用于测定神经毒素多肽的生物学活性的细胞测试系统有效
| 申请号： | 201380053762.1 | 申请日： | 2013-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN104736697B | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | K-H·艾泽勒;K·哈廷 | 申请（专利权）人： | 莫茨制药有限及两合公司 |
| 主分类号： | C12N5/0793 | 分类号： | C12N5/0793;G01N33/50 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 黄革生;刘金辉 |
| 地址： | 德国法*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及用于生成神经毒素敏感的、神经元分化的细胞的方法，所述方法包括步骤为：a)在引发所述肿瘤细胞神经元分化的条件和时间下，在培养基中培养能够分化为神经元细胞的肿瘤细胞；和b)在具有100至270mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度，并且包含(i)B27补充物和/或(ii)N2补充物的分化培养基中培养a)的经引发神经元分化的肿瘤细胞至少3天，从而获得神经毒素敏感的、神经元分化的细胞。本发明还涉及通过本发明的方法可获得的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞。此外，本发明涵盖用于测定神经毒素多肽的活性的方法，所述方法包括步骤为：a)将通过本发明的方法可获得的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞与神经毒素多肽相接触；b)在允许神经毒素多肽发挥其生物学活性的条件下培养步骤a)的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞3至74小时或72小时；和c)在根据步骤b)培养后，测定所述细胞中神经毒素多肽的活性。最后，本发明提供包含OptiMEM、FBS、B27补充物、和N2补充物的培养基。 | ||
| 搜索关键词： | 神经元 神经毒素多肽 分化 神经毒素 细胞 肿瘤细胞 敏感 生物学活性 培养基 补充物 重量摩尔渗透压 分化培养基 神经元细胞 细胞测试 涵盖 | ||
【主权项】：
1.生成神经毒素敏感的、神经元分化的细胞的方法，所述方法包括步骤为：a)在引发所述肿瘤细胞神经元分化的条件和时间下，在培养基中培养能够分化为神经元细胞的肿瘤细胞，其中肿瘤细胞是SiMa细胞；和b)在具有120至250mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度，并且包含(i)B27补充物和/或(ii)N2补充物的分化培养基中培养a)的经引发神经元分化的肿瘤细胞至少3天，从而较之在具有290至350mOsm/kg的重量摩尔渗透压浓度的分化培养基中培养的SiMa细胞，获得对梭菌神经毒素BoNT具有增加的敏感性的神经毒素敏感的、神经元分化的细胞。
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