[发明专利]建立iPS的方法有效

专利信息
申请号: 201410008450.5 申请日: 2014-01-02
公开(公告)号: CN103756969A 公开(公告)日: 2014-04-30
发明(设计)人: 程涛;李彦欣;刘淑萍;许静;顾海慧;袁卫平;张孝兵 申请(专利权)人: 中国医学科学院血液病医院(血液学研究所)
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10
代理公司: 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 代理人: 韩敏
地址: 300020 *** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明涉及一种建立iPS的方法,该方法包括如下步骤:利用ficoll分离外周血单核细胞,红系培养方法培养8天,将episomal的三个质粒用lonza的Human CD34+Cell Kit电转到单核细胞中,之后用vitrinectin处理的板子上培养,利用E6培养基培养12-15天后会看到克隆,20天左右将单克隆调到用vitrinectin处理的板子上用E8培养基培养,传代到10后鉴定。本发明建立在无插入的episomal技术上,无FBS,无feeder甚至是无动物源的iPS诱导和培养技术。
搜索关键词: 建立 ips 方法
【主权项】:
1.一种建立iPS的方法,其特征在于:包括如下步骤:利用ficoll分离外周血单核细胞,红系培养方法(无血清)培养8天,将episomal的三个质粒:pEV SFFV-OS(OS),pEV SFFV-MK(MK),pEV SFFV-B(B)电转到单核细胞中,之后用vitrinectin(人源蛋白)处理的板子上培养,利用E6培养基培养12-15天后会看到克隆,20天左右将单克隆调到用vitrinectin处理的板子上用E8培养基培养,传代到10后鉴定。
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