[发明专利]一种通过检测EDN3基因拷贝数差异来鉴定乌鸡肤色基因型的试剂盒

摘要

本发明涉及一种鉴定乌鸡肤色基因型的试剂盒，包括（1）内参基因GAPDH扩增引物；（2）目的基因EDN3扩增引物；（3）校样品DNA；（4）荧光定量PCR反应液；（5）双蒸水。采用本发明的试剂盒以待检样品DNA为模板，对目的基因EDN3和内参基因GAPDH进行实时荧光定量PCR反应，并以校样品DNA为对照，分别记录Ct值，计算得到待检样品的EDN3基因拷贝数，进而根据拷贝数差异判断乌鸡肤色的Fm基因型。本试剂盒操作无需构建标准曲线，简便快速，可重复性好，检测效率高；经鸡种测交验证，本发明方法能准确反映乌鸡个体的肤色Fm纯合与杂合。应用本检测方法有助于加快筛查乌鸡肤色纯合度，指导优质乌鸡新品系的目标选育，并为后续商业化配套杂交提供可靠种质保障。

主权项

一种通过检测EDN3基因拷贝数差异来鉴定乌鸡肤色基因型的试剂盒，其特征在于试剂盒包括：（1）内参基因GAPDH扩增引物；Forward:5’‑CAGCTCCCTCAGCTGATGC‑3’；Reverse:5’‑TCCACAATGCCAAAGTTGTC‑3’；（2）目的基因EDN3扩增引物；Forward:5’‑CACGTAACATCCTTCTGACAGC‑3’；Reverse:5’‑ATCATAAACAAACAGCCAAATC‑3’；（3）校样品DNA；（4）荧光定量PCR反应液；（5）双蒸水。