[发明专利]一种分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr及其制备方法与应用在审
申请号: | 201410029534.7 | 申请日: | 2014-01-22 |
公开(公告)号: | CN103789334A | 公开(公告)日: | 2014-05-14 |
发明(设计)人: | 熊海容;王亚伟;陈丰;张巍 | 申请(专利权)人: | 中南民族大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人: | 周宗贵;刘荣 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示,本发明中以质粒pPIC9和pAO815为模板,采用重叠PCR方法拼接质粒pAO815中酶切位点Cla I起始并包括5′AOX启动子区在内的基因片段与质粒pPIC9中信号肽基因序列起始的包括多克隆位点在内的基因片段并于3′端引入酶切位点BamH I,同时除去质粒pPIC9中信号肽基因序列上游的BamH I位点,体外构建分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr。本发明中同时还提供了木聚糖酶DSB基因单拷贝重组质粒pAO815Hr-DSB以及双拷贝重组质粒pAO815Hr-2×DSB。 | ||
搜索关键词: | 一种 分泌 拷贝 重组 表达 质粒 pao815hr 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种分泌型多拷贝重组表达质粒pAO815Hr,其特征在于:其碱基序列如SEQ IDNO.1所示。
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