[发明专利]一种shRNA-Ago2共表达慢病毒RNAi载体、重组质粒及其构建方法在审
申请号: | 201410040531.3 | 申请日: | 2014-01-27 |
公开(公告)号: | CN104805120A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
发明(设计)人: | 苟德明;康康;何洁凝;李洁璇;田生礼 | 申请(专利权)人: | 苟德明;康康 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/66 |
代理公司: | 广州番禺容大专利代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人: | 刘新年 |
地址: | 518060 广东省深圳市南*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种shRNA-Ago2共表达慢病毒RNAi载体、重组质粒及其构建方法,所述shRNA-Ago2共表达慢病毒RNAi载体,包含shRNA表达框和Ago2蛋白表达框,所述的shRNA表达框包含启动子U6、H1或7SK,以及ccdB致死基因;所述Ago2蛋白表达框包含CMV强启动子、Ago2蛋白表达基因、内部核糖体进入位点DNA序列和ZsGreen1绿色荧光蛋白表达基因。该载体引入细胞后可同时表达干扰目的基因的shRNA和增强因子Ago2及ZsGreen1绿色荧光蛋白报告基因。本发明通过共表达Ago2显著增强shRNA的沉默作用,操作简单、快速,显著提高了RNAi干扰基因的效果和持续时间,可应用在肿瘤等重大疾病的治疗等方面。 | ||
搜索关键词: | 一种 shrna ago2 表达 病毒 rnai 载体 重组 质粒 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种shRNA‑Ago2共表达慢病毒RNAi载体,其特征在于,所述RNAi载体包含shRNA表达框和Ago2蛋白表达框;所述shRNA表达框包含启动子hU6、H1或7SK,以及ccdB致死基因;所述Ago2蛋白表达框包含CMV启动子、Ago2蛋白表达基因、内部核糖体进入位点DNA序列和ZsGreen1绿色荧光蛋白表达基因。
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