[发明专利]一种单细跑海带粉及海带寡糖的制备方法

摘要

本发明涉及利用微生物分泌的胞外酶降解海带，具体是涉及一种单细胞海带粉及海带寡糖一次性的制备方法，经过菌株的筛选、粗酶液的制备、海带的降解及离心、沉淀、冻干/蒸发浓缩等工艺步骤，该方法简单，成本低，易于操作，制备的海带单细胞具备很高的营养价值及药用价值，制备的海带寡糖具备较高的生物活性，促进植物根的生长、抗菌、抗肿瘤、提高免疫力、增强体力等。 

主权项

一种单细胞海带粉及海带寡糖的制备方法，其特征在于具体制备方法为：（1）、菌株的筛选以海藻酸钠为唯一碳源，将海边采集的腐烂海带放入无菌生理盐水充分涮洗，得到冲洗液，吸取1ml冲洗液进行10倍、100倍和1000倍三个梯度稀释，每个梯度在用固体筛选培养基制备而成的平板上进行涂布，将涂布好的平板置于30℃恒温培养箱中培养，72h后观察平板，挑取周围有凹陷或者晕圈的单菌落确定为实验菌株，经16srRNA鉴定后属于假交替单胞菌属HAS；（2）、粗酶液的制备挑取该菌株的单菌落，接入液体发酵培养基中，24h后以4%的接种量进行传代，连续传4代待菌株状态稳定后，对发酵液经行离心，4000r/min，4℃，30min，所得上清液即为粗酶液；（3）、海带的降解用蒸馏水充分冲洗海带表面泥沙，将洗好的海带放入三角瓶中，加入一定量的灭菌海水，使海带的含量为10‑50%，再接入2‑10%的粗酶液，放入20‑40℃的摇床中，150r/min旋转震荡12‑48h；（4）、一次性获得单细胞海带和海带寡糖对降解产物进行离心，2000‑5000r/min下离心10‑30min，将沉淀物在‑50℃下进行冷冻干燥10‑20h，得到单细胞海带粉，上清液进行选装蒸发浓缩，经除盐除蛋白处理后在‑50℃冷冻干燥8‑12h，制备海带寡糖。