[发明专利]一种水产品中腐败希瓦氏菌的分离和检测方法有效
申请号: | 201410041477.4 | 申请日: | 2014-01-28 |
公开(公告)号: | CN103820544A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
发明(设计)人: | 朱军莉;冯立芳;赵二科 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州斯可睿专利事务所有限公司 33241 | 代理人: | 林君勇 |
地址: | 310035 浙江省杭州市教*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测水产品中腐败希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)检测方法,属于生物技术领域。一种水产品中腐败希瓦氏菌的分离和检测方法,包括如下步骤:a、腐败希瓦氏菌的分离:无菌取鲜活水产样品10g,加入无菌蛋白胨生理盐水制成溶液,稀释后涂布于大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)上进行培养,挑取菌落,分别划线到铁琼脂平板上继续培养,挑取黑色的菌落,收集细菌,抽提DNA;b、PCR分离鉴定:提取待测的产硫化氢细菌的基因组DNA,进行PCR扩增。该检测方法从分离、纯化到PCR扩增等步骤进行了优化,检测结果特异性强,灵敏度高,达10-100CFU/mL,可以对水产品中腐败希瓦氏菌进行快速分离、鉴定和分析。 | ||
搜索关键词: | 一种 水产品 腐败 希瓦氏菌 分离 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种检测腐败希瓦氏菌的引物对,其特征在于其是由具有如下所述的核苷酸序列的引物组成:第一引物对为一条引物的序列为F‑CAGTTGGGCCTTTGATGCTT,记为SEQ ID NO.1,另一条的序列为 R‑CACAGAGGTCCCTTCATCGA ,记为SEQ ID NO.2;或者是第二引物对为一条引物的序列为F‑TCAGGATAAAACATTACCATTGGA,记为SEQ ID NO.3,另一条的序列为R‑CCAGGAAAATCTTGGTGGAA ,记为SEQ ID NO.4。
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