[发明专利]水稻转基因检测试剂盒

摘要

本发明涉及检测用品领域内的一种水稻转基因检测试剂盒，由引物组合和膜芯片组成，其特征在于引物组合为6重双启动寡核苷酸引物组合，膜芯片为顺序固定在支持膜表面的6组探针序列和一组阳性对照探针序列，各探针的5’端做氨基标志；引物组合中有非对称PCR扩增引物，为5’端带生物素标志的Tag引物。本发明克服了现有技术费时费力成本高的缺陷，提供的水稻转基因检测试剂盒操作简单，快速灵敏，检测通量大，检测结果可视化，成本低廉。

主权项

一种水稻转基因检测试剂盒由引物组合和膜芯片组成，其特征在于引物组合为6重双启动寡核苷酸引物组合，各对引物的碱基序列5’‑3’如下，其中碱基I为次黄嘌呤核苷酸：Cry1Ab：正向引物： ATTCAATTCAACGACATGAAIIIIICCTTGAC反向引物：TTGTAACGGCTATTGATGGTIIIIICATCGAA；Cry1Ac：正向引物：TTCAGGACCAGGATTCACTGIIIIIGACCTCG反向引物：AGGTGAATAGGGGTCACAGAIIIIIACCTCAC；BAR：正向引物： GACGACCTCGTCCGTCTGCGIIIIIGCTATCC反向引物：CAGCAGGTGGGTGTAGAGCGIIIIICCCAGTC；CaMV35S：正向引物：GATAAAGGAAAGGCCATCGTIIIIIATGCCTC反向引物：TGGGATTGTGCGTCATCCCTIIIIICAGTGGA；NOS 3’：正向引物： TTAAGATTGAATCCTGTTGCIIIIITTGCGAT反向引物：CGCGCGCGATAATTTATCCTIIIIIGCGCGCT；gos9：正向引物： ACAGATATATAGGGCAGAAAIIIIIGCTACAA反向引物：CGTCACGTTCTTCAGGCTATIIIIIGGTACAG；膜芯片为顺序固定在支持膜表面的6组探针序列和一组阳性对照（Positive）探针序列，6组探针序列和阳性对照探针序列的碱基序列5’‑3’如下，各探针的5’端做氨基标志：Cry1Ab探针: NH₂‑5’‑GCAGCTAATCTTCACCTCAGCGTGCTTCGAGACGTTAGCGTGTTTGGGCAAAGGTGGGG‑3’；Cry1Ac探针: NH₂‑5’‑TAGAGGGTATATTGAAGTTCCAATTCACTTCCCATCCACATCTACCAGATATAGAGTTC‑3’ ；BAR探针: NH₂‑5’‑CGCAACGCCTACGACTGGACGGCCGAGTCGACCGTGTACGTCTCCCCCCGCCACCAGCG‑3’；CaMV35S探针: NH₂‑5’‑AGGAGCATCGTGGAAAAAGAAGACGTTCCAACCACGTCTTCAAAGCAAGTGGATTGATG‑3’；NOS 3’探针: NH₂‑5’‑ATGAGATGGGTTTTTATGATTAGAGTCCCGCAATTATACATTTAATACGCGATAGAAAA‑3’；gos9探针: NH₂‑5’‑GCACAAAGCTTGTTAAGATTGGTCCATGGGGTGGAAATGGAGGAGGTTCTGTAGACATA‑3’；Positive探针: NH₂‑5’‑TAGCAAGGATGAGTATTCGAACAGTTAGAGGCAGTCAGGGAGAATCACTACGTACAAGC‑3’。