[发明专利]一种从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法

摘要

本发明公开了一种从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，属化合物纯化领域。本发明采用结晶析出法和正相柱层析法相结合的方法纯化紫杉醇。首先，将红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品溶解在极性较大的有机溶媒中，然后逐滴加入反向有机溶媒，得到纯度85.0%以上的紫杉醇。然后再采用柱层析法进一步分离纯化紫杉醇，固定相为200目～300目硅胶，流动相为二氯甲烷和乙酸乙酯或正己烷和丙酮的二元梯度混合溶剂。两种方法相结合，解决以往分离方法中不能有效分离紫杉醇与三尖杉宁碱的不足，同时又可以去除难以分离的未知物杂质，最终可得到符合美国药典USP标准的紫杉醇原料药。该方法重复性好、工艺合理、操作简单、绿色安全。

主权项

一种从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，其特征在于，采用结晶析出法和正相柱层析法相结合的方法分离紫杉醇，首先，将从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品溶解在极性较大的有机溶媒中，使紫杉醇粗品与有机溶媒质量体积比在0.04‑0.10 g/mL，然后逐滴加入反向有机溶媒，得到提纯的紫杉醇；然后再采用正相柱层析法进一步分离紫杉醇：固定相为200目～300目硅胶，流动相为二氯甲烷和乙酸乙酯或正己烷和丙酮的二元梯度混合溶剂；所述的极性较大的有机溶媒选丁醇、丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁脂或二氯甲烷；所述的反向有机溶媒为戊烷、异戊烷、正己烷、环己烷、异辛烷或石油醚。