[发明专利]牛体外受精胚胎培养液和培养方法有效
申请号: | 201410073635.4 | 申请日: | 2014-02-28 |
公开(公告)号: | CN103898046A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 杜卫华;孙尉俊;朱化彬 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种专用于牛体外受精胚胎的培养液,所述培养液中含NaCl109.0-110mM、KCl2.9-3.1mM、NaHCO326.0-26.5mM、MgCl2·6H2O0.5-1.0mM、KH2PO31.0-1.3mM、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L-谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1-10mM。将牛体外受精胚胎置于上述培养液中进行体外培养,结果显示明显优于未添加GSH的对照组,提高了囊胚发育率及胚胎质量,降低体外生产胚胎的成本,为牛IVF技术应用于实践提供实验基础,可大大加速遗传育种进程。 | ||
搜索关键词: | 体外受精 胚胎 培养液 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种牛体外受精胚胎培养液,其特征在于,所述培养液配方为:NaCl 109.0‑110mM、KCl 2.9‑3.1mM、NaHCO326.0‑26.5mM、MgCl2·6H2O0.5‑1.0mM、KH2PO31.0‑1.3mM、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L‑谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1‑10mM,以水配制;所述必需氨基酸为以下氨基酸按比例混合后配制的水溶液,其中,各氨基酸含量为:L‑盐酸精氨酸6.32g/L、L‑胱氨酸二盐酸盐1.564g/L、L‑盐酸组氨酸一水物2.1g/L、L‑异亮氨酸2.625g/L、L‑亮氨酸2.62g/L、L‑赖氨酸盐酸盐3.625g/L、L‑蛋氨酸0.755g/L、L‑苯丙氨酸1.65g/L、L‑苏氨酸2.38g/L、L‑色氨酸0.51g/L、L‑酪氨酸1.8g/L和L‑缬氨酸2.34g/L;所述非必须氨基酸为以下氨基酸按比例混合后配制的水溶液,其中,各氨基酸含量为:L‑丙氨酸0.89g/L、:L‑天门冬酰胺一水物1.5g/L、L‑天冬氨酸1.33g/L、L‑谷氨酸1.47g/L、甘氨酸0.75g/L、L‑脯氨酸1.15g/L和L‑丝氨酸1.05g/L。
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