[发明专利]利用GST表达体系制备AQP7胞外段抗体及应用在审
申请号: | 201410079643.X | 申请日: | 2014-03-06 |
公开(公告)号: | CN104892758A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
发明(设计)人: | 李晓萌;赵兵;杨百全;徐洪香;李江 | 申请(专利权)人: | 东北师范大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06;C07K19/00;C12N15/70 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 130024 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明属于生物工程技术领域,涉及利用GST表达体系制备的AQP7胞外段高效价抗体及应用。利用基因工程技术,将AQP7基因胞外段克隆到原核表达载体中,经酶切鉴定后,用重组质粒转化大肠杆菌,并IPTG诱导产生GST-AQP7融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清并用ProteinA/G纯化。抗体的效价及特异性采用ELISA和Westernblot检测。该抗AQP7多克隆抗体效价与特异性良好,可以应用于细胞中AQP7蛋白的检测并能有效检出AQP7蛋白在不同细胞中的差异表达,对于系统研究AQP7蛋白功能意义重大。 | ||
搜索关键词: | 利用 gst 表达 体系 制备 aqp7 胞外段 抗体 应用 | ||
【主权项】:
利用GST表达体系制备的AQP7蛋白胞外段高效价抗体,其特征在于利用GST表达体系以(AQP7蛋白218‑255位氨基酸对应对应DNA片段作为特异序列制备的GST‑AQP7融合蛋白作为抗原免疫动物产生抗血清而获得,该抗血清中抗GST‑AQP7抗体的滴度高达1∶1000000,并经过Westernblot鉴定该AQP7抗体具有较好的特异性,其中,218‑255位氨基酸序列为: 其对应核苷酸序列为: 。
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