[发明专利]提取结核杆菌DNA的方法及检测其多重耐药性的试剂盒在审
申请号: | 201410093113.0 | 申请日: | 2014-03-13 |
公开(公告)号: | CN103911365A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 李沛祥 | 申请(专利权)人: | 南京爱必梦生物材料有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210000 江苏省南京市浦口*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种提取结核杆菌DNA的方法以及快速准确检测结核分枝杆菌多重耐药性(multiple drug resistence,MDR)的试剂盒。该方法包括从由临床样本提取待检DNA,应用荧光实时定量PCR确定结核分枝杆菌感染、鉴别是否为耐药性及何种耐药性菌株感染,最终确定病原体感染数量。本发明方法可以检测目前已确定可引起结核菌耐药(包括利福平、异烟肼和乙胺丁醇)的全部耐药基因共29个位点,是迄今为止囊括结核耐药基因最全面的快速分子诊断系统。另外通过独特的引物、探针和选择荧光染料标记设计,实现应用多重qPCR检测上述全部耐药基因位点,得到应用简便快速、结果准确可靠,对于快速诊断结核菌感染、确定耐药性从而进行有针对性的治疗具有巨大的实用价值和广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 提取 结核杆菌 dna 方法 检测 多重 耐药性 试剂盒 | ||
【主权项】:
提取结核杆菌DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:a)、碱处理,将生物样本(痰液)加入NaOH溶液内液化处理;b)、一次离心,将上述液化后的生物样本置入离心机内离心,弃上清液;c)、Tris缓冲液洗涤沉淀,弃去上清液;d)、加入DNA提取液,沸水浴5‑15分钟;e)、二次离心,将上步所得液体置于离心机内离心,收集上清液,即得结核杆菌DNA。
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