[发明专利]一种真菌菌丝总DNA的提取方法在审
| 申请号： | 201410102771.1 | 申请日： | 2014-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN103820434A | 公开（公告）日： | 2014-05-28 |
| 发明（设计）人： | 李小林;郑林用;李昕竺;曾先富;黄羽佳 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院土壤肥料研究所;成都市农林科学院;四川省技术创新促进会 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12R1/645 |
| 代理公司： | 成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124 | 代理人： | 高芸;梁鑫 |
| 地址： | 610066 四川省成都市锦江区*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明属于真菌的分子生物学研究领域，具体涉及一种真菌菌丝总DNA的提取方法，具有免液氮研磨又能较为彻底打破细胞壁提取真菌菌丝总DNA的优点，其步骤如下：（1）收集真菌菌丝体；（2）置于DNA提取液中，捣碎；（3）在-80℃的低温环境与65℃水浴环境中反复冻融2～3次；（4）加入蛋白酶K和溶菌酶处理；（5）去酶及纯化DNA。该处理方法简单，所需试剂常见；采用反复冻融、捣碎的方式使样品可免于使用液氮研磨，便于不易获得液氮的地方使用；未使用研钵防止了交叉污染；也避免使用苯酚、β-巯基乙醇等有毒试剂；整个提取过程温和，提取真菌菌丝总DNA质量高，可进行ITS序列PCR扩增及测序等后续分子生物学研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 真菌 菌丝 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
真菌菌丝总DNA的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）收集真菌菌丝体；（2）真菌菌丝体置于DNA提取液中，捣碎真菌菌丝体；（3）在‑70℃至‑85℃的低温环境与60‑65℃水浴环境中反复冻融2～3次；（4）加入蛋白酶K和溶菌酶处理；（5）去酶及纯化DNA。
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