[发明专利]一种基因单碱基变异的CRAS-PCR检测方法在审
申请号: | 201410107860.5 | 申请日: | 2014-03-21 |
公开(公告)号: | CN104164478A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
发明(设计)人: | 黄庆;府伟灵;张阳;杨昭;黄君富;夏涵 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 王明书 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明提供了一种基因单碱基变异的CRAS-PCR检测方法。在该检测方法中,同时使用了能够特异性识别单碱基变异野生型和突变型核酸序列的单链型或双链型等位基因特异性蝎形引物,以及等位基因特异性蝎形引物的共用引用。通过分析PCR扩增过程中各个竞争性等位基因特异性蝎形引物所产生的荧光信号种类与强度,可在单个PCR反应管内定性和定量检测单碱基变异的不同基因型,检测结果准确可靠,并且具有良好的线性范围和灵敏度,无非特异性扩增所导致的假阳性结果,也能完全避免假阴性结果。 | ||
搜索关键词: | 一种 基因 碱基 变异 cras pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种基因单碱基变异的CRAS‑PCR检测方法,其检测体系中包括野生型和突变型等位基因特异性蝎形引物、上述等位基因特异性蝎形引物的共用引物,其特征在于:野生型和突变型基因的等位基因特异性蝎形引物具有相同的3'‑端延伸或扩增方向;野生型和突变型基因的等位基因特异性蝎形引物和共用引物存在于同一个反应体系中;野生型和突变型基因的等位基因特异性蝎形引物3'‑末端与其基因型序列完全匹配,并通过此3'‑末端识别基因型。
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