[发明专利]松果菊‘王冠’的组织培养方法

摘要

本发明涉及一种松果菊‘王冠’的组织培养方法，该方法包括：（1）无菌材料的获得、（2）不定芽的诱导、（3）生根培养、（4）炼苗与移栽四个步骤，其中诱导培养基为MS+0.1~1.0mg/L6-苄氨基腺嘌呤+0.1~1.0mg/L萘乙酸+30~32g/L蔗糖+6.8~7.0g/L琼脂粉，pH5.6~5.8，培养28~30天时间，培养条件温度在23~26℃，光照强度为1500~2000Lux，光照时间12h；生根培养基为1/2MS+0.1~1.0mg/L吲哚丁酸+30~32g/L蔗糖+6.8~7.0g/L琼脂粉，pH为5.6~5.8，18~20天后，基部长出3~24条主根，主根长度均值为4.5cm。采用该种组织培养方法，可以提高松果菊‘王冠’的诱导成活率，有利于松果菊‘王冠’在我国短期内的推广种植。

主权项

一种松果菊‘王冠’的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）无菌材料的获得选取饱满的种子为材料，在超净工作台上用75%的酒精消毒10~40s，然后用无菌水冲洗3~5遍，再用次氯酸钠溶液消毒10~30分钟，然后用无菌水冲洗4~6遍，用无菌滤纸吸干多余水分后接种到MS培养基中，28~30天后待种子长出无菌苗；（2）不定芽的诱导将步骤（1）中获得的无菌苗作为材料，切下2‑4cm的叶柄作为外植体，接种到诱导培养基上，调节pH至5.6~5.8，培养28~30天时间，培养温度为23~26℃，光照强度为1500~2000Lux，光照时间为10~12h；（3）生根培养将步骤（2）中诱导的高度2~5cm的丛生苗切成单株接种到生根培养基上，调节pH至5.6~5.8，培养18~20天后，基部长出3~24条主根，主根长度均值达到4.5cm；（4）炼苗与移栽将高度在2~5cm，叶片数在2~6片、根系长度在3~6cm的组培苗进行炼苗，打开瓶盖2~3天，使其适应外界环境，2~3天后洗掉根部的培养基，用700~900倍的多菌灵浸泡1~10分钟，移栽至大棚内，覆膜保湿且遮光。