[发明专利]一种检测柑橘衰退病毒T3基因型的实时荧光定量RT-PCR方法无效
申请号: | 201410142402.5 | 申请日: | 2014-04-11 |
公开(公告)号: | CN103937909A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 陶珍珍;周常勇;周彦;宋震;李中安 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院柑桔研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人: | 郭云 |
地址: | 400712 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测柑橘衰退病毒T3基因型的实时荧光定量RT-PCR方法,包括以下步骤:1)提取待测样品总RNA;2)以所提取的RNA为模板,利用T3基因型的特异性引物T3-4R进行反转录反应,得到反转录产物cDNA;3)利用特异性引物T3-4F和T3-4R,以反转录产物cDNA为模板进行实时荧光定量RT-PCR检测;特异性引物T3-4F和T3-4R序列如下:T3-4F:TCTAAATTCTACCCGAGGCAT;T3-4R:TTTTCCGCTTGTGTATAAACGA。该检测方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简便、重复性好的特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 柑橘 衰退 病毒 t3 基因型 实时 荧光 定量 rt pcr 方法 | ||
【主权项】:
一种检测柑橘衰退病毒T3基因型的实时荧光定量RT‑PCR方法,包括以下步骤: 1)提取待测样品总RNA作为反应模板; 2)以步骤1所提取的RNA为模板,利用T3基因型的特异性引物T3‑4R进行反转录反应,得到反转录产物cDNA; 3)利用特异性引物T3‑4F和T3‑4R,以及步骤2得到的反转录产物cDNA为模板进行实时荧光定量RT‑PCR检测; 所述的特异性引物T3‑4F和T3‑4R序列如下: T3‑4F:TCTAAATTCTACCCGAGGCAT T3‑4R:TTTTCCGCTTGTGTATAAACGA。
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