[发明专利]一种以载体两性电解质修饰γ-谷氨酰转肽酶固定化酶的方法

摘要

本发明公开了一种以载体两性电解质修饰γ-谷氨酰转肽酶固定化酶的方法，甲苯的溶剂环境中，用3-氨丙基三乙氧基硅烷对介孔氧化钛表面进行化学改性反应，得到改性后的介孔二氧化钛；将γ-谷氨酰转肽酶酶液和介孔二氧化钛混合，振荡制得固定化酶；将固定化酶与两性电解质Pharmalyte（CA）混合，振荡反应；滤去残液，用缓冲液洗涤，滤干后即得。本发明利用高比表面积的介孔氧化钛为载体对GGT进行固定化，载体担载量高；同时以等电点与GGT最适pH相近的载体两性电解质对固定化酶进行修饰，在提高固定化酶稳定性的同时，有效改善了固定化γ-谷氨酰转肽酶的pH耐受性，使其在pH6～11范围内均保持了较高活性。

主权项

一种以载体两性电解质修饰γ‑谷氨酰转肽酶固定化酶的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）甲苯的溶剂环境中，用3‑氨丙基三乙氧基硅烷对介孔氧化钛表面进行化学改性反应，得到改性后的介孔二氧化钛；（2）将γ‑谷氨酰转肽酶酶液和步骤（1）得到的介孔二氧化钛混合，振荡制得固定化酶；（3）将步骤（2）得到的固定化酶与两性电解质Pharmalyte混合，振荡反应；（4）将步骤（3）反应液滤去残液，用缓冲液洗涤，滤干后即得。