[发明专利]一种蕲蛇提取物及其应用

摘要

本发明公开了一种蕲蛇提取物及应用，所述蕲蛇提取物按如下方法制备向含糖皮质激素受体基因的重组工程菌经发酵培养获得的发酵液中加入IPTG进行诱导培养，获得诱导培养液；将诱导培养液离心，收集沉淀经超声破碎后提取蛋白，获得糖皮质激素受体蛋白；所述糖皮质激素受体基因的核苷酸序列为SEQ ID NO1所示；将糖皮质激素受体蛋白偶联到Ni‑NTA Agarose柱作为固定相，再将蕲蛇水煎剂作为流动相流经Ni‑NTA Agarose柱，然后PBS洗涤柱子两次，加入IgG Elution Buffer洗脱液进行洗脱，收集流出液，获得蕲蛇提取物；本发明制备的蕲蛇提取物，可以增强糖皮质激素受体与NF‑κB相互作用，具有潜在的抗炎效应，为糖皮质激素的替代品提供了依据。

主权项

一种蕲蛇提取物，其特征在于所述蕲蛇提取物按如下方法制备：（1）糖皮质激素受体蛋白制备：向含糖皮质激素受体基因的重组工程菌经发酵培养获得的发酵液中加入IPTG进行诱导培养，获得诱导培养液；将诱导培养液离心，收集沉淀经超声破碎后提取蛋白，获得糖皮质激素受体蛋白；所述糖皮质激素受体基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示；（2）蕲蛇提取物：将步骤（1）制备的糖皮质激素受体蛋白偶联到Ni‑NTA Agarose柱作为固定相，再将蕲蛇水煎剂作为流动相流经Ni‑NTA Agarose柱，然后PBS洗涤柱子两次，加入IgG Elution Buffer洗脱液进行洗脱，收集流出液，获得蕲蛇提取物；所述蕲蛇水煎剂按如下方法制备：将蕲蛇粉末与双蒸水以质量比1：100混合后煎煮至原料体积的5%，过滤，滤液冷冻干燥后用pH值为7的磷酸缓冲液溶解，过滤，滤液即为蕲蛇水煎剂。