[发明专利]以痕量DNA为基础的二代测序文库构建方法有效
| 申请号： | 201410158326.7 | 申请日： | 2014-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN103938277A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 杨祖玉;王开乐;吴大飞;吕雪梅;吴仲义 | 申请（专利权）人： | 中国科学院北京基因组研究所 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 郎坚;唐宁 |
| 地址： | 100101 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种针对痕量DNA样本的二代测序文库的构建方法，利用随机碱基对每一个原始分子进行标定，进而通过现有的二代测序平台获得相应的DNA文库。本方法通过微量细胞分离、总DNA提取、插入片段的构建、PCR扩增基因组文库及及琼脂糖凝胶电泳回收目的片段等步骤，成功构建只需10-40ngDNA起始的全基因组二代测序文库。 | ||
| 搜索关键词： | 痕量 dna 基础 二代 序文 构建 方法 | ||
【主权项】：
本发明涉及一种针对痕量DNA样品，构建二代测序文库的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤： 步骤（1）、细胞分离及细胞总DNA提取； 步骤（2）、构建Inserting DNA1与Inserting DNA2插入序列双链； 步骤（3）、以步骤（2）所获得的插入序列双链组装插入复合体； 步骤（4）、以插入复合体打断待测DNA，PCR扩增测序片段； 步骤（5）、回收扩增的PCR片段，并进行测序建库工作。
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