[发明专利]边界病病毒重组E2蛋白及其IgG抗体检测试剂盒无效
| 申请号： | 201410161997.9 | 申请日： | 2014-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN103951734A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 毛立;李文良;刘霞;江杰元;杨蕾蕾;张纹纹;邓加武;王钟毓 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C07K14/08 | 分类号： | C07K14/08;C12N15/40;C12N15/70;G01N33/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 张素卿 |
| 地址： | 210014*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学领域，涉及一种边界病病毒（BDV）重组E2蛋白及其IgG抗体检测试剂盒。系将BDVE2蛋白主要抗原区域克隆入原核表达载体得到重组表达载体，将该重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)，经重组大肠杆菌表达纯化后获得重组BDVE2蛋白，Westernblot试验证明该蛋白具有良好的抗原性。将该蛋白包被酶标板，通过抗原包被浓度、血清稀释度和作用时间、二抗浓度和作用时间以及显色时间的优化建立ELISA方法，检测山羊BDV阴性血清确定临界值和判定标准。本发明构建的重组菌株对外源蛋白表达稳定，抗原性好；在此基础上首次用于建立边界病病毒IgG抗体ELISA检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 边界 病毒 重组 e2 蛋白 及其 igg 抗体 检测 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种边界病病毒重组E2蛋白，该蛋白系将包含E2主要抗原区的基因片段克隆入原核表达载体pET‑32a得到重组表达载体，将该重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)，该重组大肠杆菌BL21(DE3)培养至OD600达0.6‑0.8时加入终浓度为0.5mM的IPTG进行诱导表达，分离菌体经Ni亲和层析柱纯化获得。
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