[发明专利]一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法

摘要

本发明公开了一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法，该方法首先用微乳法制备纳米铝佐剂：将等比例的苯扎溴铵、正辛醇、环己烷高速搅拌后加入适量的AlCl3溶液搅拌。缓慢滴加氨水，保持反应体系PH>10反应2h，然后加入丙酮破乳离心，沉淀物离心洗涤三次，将离心后的沉淀干燥箱中干燥过夜，即得到蓬松的纳米Al(OH)₃佐剂。然后将H22肝癌细胞悬液与纳米铝佐剂共孵育，得到纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗。本发明制得的纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗粒径小、分散性好、具有较好的稳定性，有良好的生物相容性。动物实验结果显示：纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗抗肿瘤作用明显优于普通铝佐剂。

主权项

一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1）制备纳米铝佐剂：按质量比1:1:1将苯扎溴铵、正辛醇、环己烷高速混合后搅拌均匀，得到的混合溶液置入磁力搅拌器上，按正辛醇与AlCl₃质量比1:1.3~1.5，将后者加入所述混合溶液中搅拌20min以上，然后按20~30滴/min的速度向混合溶液中滴加氨水，保持反应体系PH>10反应2h，得到乳浊液；向所述乳浊液中加入丙酮，至乳浊液变清，以>500rpm的速度离心，弃去上清液，得到沉淀物；最后将沉淀物先后用双蒸水、乙醇离心洗涤各三次后，置于干燥箱中干燥，即得到纳米铝佐剂；2）制备纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗：将H22肝癌细胞悬液与浓度为2~4mg/ml的纳米铝佐剂4℃共孵育7天，即得到纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗。