[发明专利]光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法

摘要

本发明公开了一种光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，步骤包括：1)具有特定氨基酸序列的多肽和功能性四唑按照投料比为1：(2,4,6,8,10)混合，通过酯化反应将四唑连接到多肽分子上；2)得到的多肽四唑衍生物与端基修饰甲基丙烯基团的双链DNA按照摩尔比1:(2,3,4)在pH7.4、37℃条件下混合，波长300～400nm的紫外灯照射100～200s，引发四唑-烯反应，迅速交联形成凝胶；本发明的有益效果为：水凝胶在制备的过程中具有时空可控性，无须光引发剂和铜盐等催化剂，得到了荧光性能的多肽水凝胶，具有很强的示踪性，双链DNA分子中的核酸适体有靶向功能，在生物医学和靶向治疗等领域有着潜在的应用价值。

主权项

光控四唑‑烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 多肽四唑衍生物的合成： (1)在氮气的保护下，向50mL两颈瓶中加入0.2～0.4g四唑，二氯甲烷15～20ml搅拌至溶解，得到四唑的二氯甲烷溶液； (2)向四唑的二氯甲烷溶液中加入DCC150～200mg继续搅拌15～20min，得到四唑溶液； (3)将多肽溶于5～10mL二氯甲烷中，得多肽溶液，其中，多肽的氨基酸序列为ThrSerThrSerThrSerThrSerThrSerThrSer，将上述多肽溶液加入到步骤(2)所得的四唑溶液中，搅拌15～20min；向多肽与四唑的混合液中加入10～15mg DMAP，反应10～12h，过滤，滤液用冰乙醚沉淀，干燥后得到多肽分子的四唑衍生物； 多肽水凝胶的光控点击合成： (4)分别将步骤(3)所得多肽四唑衍生物和端基修饰烯丙基的双链DNA溶于Tris‑HCl缓冲液中，至完全溶解，其中多肽与DNA的摩尔比为1:2～1:4； (5)将步骤(4)所得混合液在37℃下混合均匀后，于真空条件下，置于波长300～400nm的紫外灯下，光照100～200s，引发四唑‑烯点击化学反应，迅速交联形成具有荧光性能的多肽水凝胶。