[发明专利]从玉米浆中提取生物素的方法及其薄层层析扫描检测方法

摘要

本发明公开了一种从玉米浆中提取生物素的方法，以玉米浆为原料，经N,N-二甲基甲酰胺提取，无水乙醇提取除杂，丙酮提取除杂，乙酸丁酯和环己烷提取除杂，最终得到含生物素的样品液。本发明还提供了一种生物素的薄层层析扫描检测方法，(1)取待检测样品液，点在涂有硅胶GF254高效薄层板上，加入展开剂，在展开缸内展开，然后将薄层板拿出放在通风柜中晾干；(2)展完后晾干的展板，用染色液喷雾染色，得到与背景对比明显的标准品的斑点和样品的斑点；(3)利用Camag3型薄层扫描仪以530nm吸收波长进行薄层层析扫描，计算出样品液中生物素的质量浓度。具有简单、快速、准确、可靠、稳定等优点。

主权项

一种从玉米浆中提取生物素的方法，其特征在于：步骤如下：(1)取玉米浆，加入1～2倍的N,N‑二甲基甲酰胺，加热提取，提取温度为75℃～85℃，提取时间为1～2h，提取后过滤，得提取液和滤渣；用无水乙醇洗涤滤渣3～5次，过滤，合并滤液得乙醇洗涤液，每次无水乙醇的用量与玉米浆的体积相等；将提取液和乙醇洗涤液合并，过滤，滤液蒸发浓缩至玉米浆体积的8/10～6/10，得浓缩液；(2)向步骤(1)所得浓缩液中加入3倍的无水乙醇，静置，过滤除去沉淀，滤液蒸发浓缩至玉米浆体积的4/10～3/10，得浓缩液；(3)向步骤(2)所得浓缩液中加入4～5倍的丙酮，静置，过滤除去沉淀，滤液蒸发浓缩至玉米浆体积的2/10，得浓缩液；(4)向步骤(3)所得浓缩液中加入3～4倍的丙酮，静置，过滤除去沉淀，蒸发浓缩至玉米浆体积的1/20，得浓缩液；(5)步骤(4)所得浓缩液中加入乙酸丁酯和环己烷，乙酸丁酯、环己烷的加入量与浓缩液的体积相同，静置分层；取上清液，即为生物素溶液。