[发明专利]脐带间充质干细胞诱导培养为神经细胞的方法

摘要

本发明提供了一种将脐带间充质干细胞诱导培养为神经细胞的方法，采用预诱导和诱导二步结合法，并配制了优化的预诱导培养液和诱导培养液，通过该诱导方式，诱导周期短、细胞分化均一度高，而且电生理检测发现该神经细胞具有诱导放电功能，成功得到诱导的神经细胞。

主权项

一种脐带间充质干细胞诱导培养为神经细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、脐带间充质干细胞的培养和扩增：获得脐带间充质干细胞单体，将脐带间充质干细胞单体按1‑5×10⁵/ml接种于脐带间充质干细胞培养液中，每3‑8天换液传代一次，得到培养的细胞；所述脐带间充质干细胞培养液含DMEM/F12，2％B27，2‑4mM L‑谷氨酰胺，1mM硫代甘油，1％非必需氨基酸，EGF20‑40ng/ml，bFGF20‑30ng/ml，80‑90U/ml青霉素，60‑70μg/ml链霉素；(2)、预诱导分化：将步骤(1)得到的培养细胞按1～5×10⁴/ml的细胞密度接种进行贴壁诱导培养，贴壁培养3天后更换预诱导培养液进行培养，3天后半量换液，第3‑4天时终止诱导；所述预诱导培养液为DMEM作为基础培养基，在此基础上还含有20nmol～50nmol的维生素C，10‑20U/ml人白细胞抑制因子，1‑8mM L‑谷氨酰胺，2‑5mM硫代甘油，80‑100U/ml青霉素，80‑100μg/ml链霉素。