[发明专利]用于生产异丁香酚单加氧酶的大肠埃希氏菌及构建和应用有效
| 申请号： | 201410204528.0 | 申请日： | 2014-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN104031873B | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 赵丽青;马田田;吴序栎;李小曼;宋江宁 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/02;C12P7/24;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳新创友知识产权代理有限公司44223 | 代理人： | 刘莉 |
| 地址： | 518060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于生产异丁香酚单加氧酶的大肠埃希氏菌及构建方法和应用，该大肠埃希氏菌命名为BL21(DE3)IEM‑PP，保藏编号为CGMCC No.8918。构建方法是利用PCR技术，以土壤的全基因组DNA为模板，在PCR引物作用下扩增得到长度为1438bp的片段，经切胶回收并纯化处理后同T载体pET21(a)连接得到克隆载体重组质粒PET21(a)‑IEM的重组菌BL21(DE3)IEM‑PP，可以应用该重组菌生物转化异丁香酚生产香草醛。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 生产 丁香 酚单加氧酶 大肠 埃希氏菌 构建 应用 | ||
【主权项】：
一种香草醛的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：按异丁香酚:异丁香酚单加氧酶:缓冲液＝0.1～0.4g:0.2～1.2g:9～18mL加入反应容器中，在20～28℃下振摇转化12～48h，得到香草醛；所述缓冲液为pH8～10.4的甘氨酸/NaOH水溶液；在所述反应容器中，添加香草醛吸附剂；每0.1～0.4g异丁香酚中：香草醛吸附剂的加入量≤0.6g，所述香草醛吸附剂是壳聚糖膜。
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