[发明专利]一种丙型肝炎病毒基因分型的试剂盒

摘要

本发明涉及一种疾病病原体基因检测技术，尤其涉及一种丙型肝炎病毒基因分型检测的试剂盒，可用于检测国内发生的丙型肝炎病毒的1a、1b、2a、2b、3a、3b和6a型别感染的辅助诊断。本发明采用尼龙膜载体，针对HCV不同基因型设计寡核苷酸探针，制备成基因芯片，再配以PCR引物以及其他组分，可以快速准确对血液样品中丙型肝炎病毒进行分型。本发明的丙型肝炎病毒基因分型的试剂盒具有快速、灵敏、准确、高通量的特点，一次杂交反应可以检测多种靶序列，取材方便，无需特殊设备，仪器投入低，具有快速简便、敏感度高和特异性强的特点。

主权项

一种丙型肝炎病毒基因分型的试剂盒，包括PCR反应液和DNA杂交膜条，其特征在于，所述DNA杂交膜条包括尼龙膜，所述尼龙膜上固定有探针，所述探针为分别与丙型肝炎病毒各种亚型病毒的核酸杂交的核苷酸，所述探针序列如下所示：针对HCV1a型设计探针Y1：5’‑GCAGGGGCCCTAGATTGGGT‑3’；针对HCV1b型设计探针Y2：5’‑CGTGGAAGGCGACAACCTA‑3’；针对HCV1b型设计探针Y3：5’‑AACCTCGTGGAAGGCGACAACC‑3’；针对HCV2a型设计探针Y4：5’‑ATTGCCGGGAAGACTGGGTC‑3’；针对HCV2a型设计探针Y5：5’‑ACTTCGGAGCGGTCCCA‑3’；针对HCV2b型设计探针Y6：5’‑CAGCCCATCCCGAAAGATCGG‑3’；针对HCV2b型设计探针Y7：5’‑GAATTACCGGAAAGACTGGGT‑3’；针对HCV3a型设计探针Y8：5’‑AATCGCTGGGGTGACCGG‑3’；针对HCV3a型设计探针Y9：5’‑TCTGAACGGTCACAGCCTC‑3’；针对HCV3a型设计探针Y10：5’‑CCCGCGAGATCACTAGCC‑3’；针对HCV3b型设计探针Y11：5’‑CGCTCAATGCCCGGAAATT‑3’；针对HCV6a型设计探针Y12：5’‑GACCGGGTCCTTTCCATTGG‑3’；针对HCV6a型设计探针Y13：5’‑GAGCGATCCCAGCCCAGAG‑3’；针对HCV6a型设计探针Y14：5’‑GAACGGTCCCAGCCCAGAG‑3’；针对HCV1‑6型设计通用探针Y15：5’‑TTGGGTGTGCGCGCGAC‑3’；阴性探针HN:5’‑GGTCCTGTTTAACTGGCG‑3’；所述探针5’端进行氨基标记以与尼龙膜偶联。