[发明专利]一种铁皮石斛的单倍体育种方法

摘要

本发明公开了一种铁皮石斛的单倍体育种方法，包括下述步骤：a.取铁皮石斛开花3-6天的花朵，在常温下接种花粉后在低温4℃的花药愈伤组织诱导培养基中处理45-50小时，再进行常规培养；b.用NaCIO溶液灭菌15分钟，将消毒后的花蕾在无菌环境下剥出花药，接种于花药愈伤组织诱导培养基中，用保鲜膜封口；c.在25℃下进行黑暗恒温培养，2-3天，再在进行黑暗震荡培养12-15天，得到胚状体；d.收集胚状体，接种至分化培养基，得到单倍体植株；e.用秋水仙碱对单倍体植株的根系进行加倍处理。本发明可以很好的解决目前铁皮野生品系的保存和优质品种的开发的问题；从而可以改良铁皮石斛品种，同时可以选育铁皮石斛新品种。

主权项

一种铁皮石斛的单倍体育种方法，其特征在于：其包括下述步骤：a.取铁皮石斛开花3‑6天的花朵，培养前在常温下接种花粉后在低温4℃的花药愈伤组织诱导培养基中处理45‑50小时，再进行常规培养；b.用浓度为5％‑6％的NaCIO溶液灭菌15分钟，无菌水冲洗5次，将消毒后的花蕾在无菌环境下剥出花药，尽量防止花药受到伤害，接种于花药愈伤组织诱导培养基中，用保鲜膜封口；c.在25℃下进行黑暗恒温培养，2‑3天，再在进行黑暗震荡培养12‑15天，得到胚状体；d.收集胚状体，接种至分化培养基，再在组培室中光照培养12小时/天，温度控制在24‑26℃；待植株发育良好，开盖炼苗5天；炼苗后移入营养基质中培养，得到单倍体植株；e.用秋水仙碱对单倍体植株的根系进行加倍处理，利用流式细胞仪对所有幼苗新长出的叶片进行倍性分析，如果是单倍体则进行秋水仙碱加倍处理；植株恢复正常后移入大田进行正常栽培。