[发明专利]一种无引物的基因合成方法在审
申请号: | 201410211672.7 | 申请日: | 2014-05-19 |
公开(公告)号: | CN104109683A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 马立新;沈鹤霄;陈晚苹;华权高;张桂敏;杨明波;陈羽西 | 申请(专利权)人: | 武汉金开瑞生物工程有限公司;湖北大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/10;C40B40/06 |
代理公司: | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人: | 刘杰 |
地址: | 430206 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种无引物的基因合成方法,属于基因的人工合成领域。本发明首先公开了一个pNew载体质粒,其核苷酸序列为SEQ ID NO.33所示。本发明还公开了用pNew载体质粒构建的包含有16384(47)个质粒的载体库。本发明进一步公开了一种无引物的基因合成方法,包括以下步骤:(1)将待合成的目标基因DNA序列按照每个片段82bp进行分组;(2)将分组的片段分别在构建的质粒库中找到对应的质粒;(3)将对应的质粒酶切,用抗生素筛选,重构得到含82bp目的基因序列的质粒;(4)通过金门克隆反应将基因片段拼接成完整的目的基因。本发明基因合成方法不需要利用引物,合成成本低,突变率极其低,准确率高,可以合成诸如高度重复序列、Poly A等特殊的基因序列,操作简单,能实现自动化操作。 | ||
搜索关键词: | 一种 引物 基因 合成 方法 | ||
【主权项】:
合成基因用的pNew载体质粒,其特征在于:其核苷酸序列为SEQ ID NO.33所示。
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