[发明专利]一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用

摘要

本发明属于医药领域，涉及将血液中所有糖链降解为单糖再进行检测的方法在癌症检测中的应用。所述降解得到并检测单糖的方法中的样品为血液，所述的癌症包括肺癌、胃癌、卵巢癌、阴茎癌、食管癌、口腔癌、胆管癌、乳腺癌、壶腹部癌、直肠癌、膀胱癌。此检测方法具有操作步骤简单易学，方法容易普及，检测耗时短，对仪器要求低，检测成本低，血液用量少等特点。所得结果显示血液中8种单糖的含量不仅可以区分正常人和癌症病人，还可区分不同癌症。这种将糖组学知识简单化并应用于血液癌症生物标志物的检测属世界范围内首创。

主权项

一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用，所述的降解得到并检测单糖的方法步骤包括：(1)取样品至安瓿瓶，每管加1mL2M C₂HF₃O₂；(2)封管，105℃油浴6h，得水解样品溶液；(3)将水解样品溶液冷却至室温，冷凝浓缩除C₂HF₃O₂；(4)每管加100uL甲醇，离心浓缩除残留C₂HF₃O₂，重复三次；(5)得到的干燥样品每管用水溶，再加NH₃·H₂O调pH至8‑14，充分混匀后在室温下静置，再加入1‑苯基‑3‑甲基‑5‑吡唑啉酮(PMP)水浴；(6)取出反应物冷却至室温，加HAc中和；(7)每管加入CHCl₃萃取后弃下层CHCl₃层，重复三次，将得到的水层过0.22um滤膜，待用于高效液相色谱分析；色谱条件色谱柱：ZORBAX SB‑C18，0.1M磷酸盐(13.6gKH₂PO₄，1.8gNaOH)(pH6.7)缓冲液‑乙腈(体积比83∶17)等度洗脱，流速：1.0mL/min，检测波长：245nm，进样体积：20uL；其特征在于，所述降解得到并检测单糖的方法中的样品为血液，所述的应用为将癌症病人或正常人血液中的糖链降解为单糖，检测单糖含量。