[发明专利]来自丁酸梭菌的脂磷壁酸及其调节畜禽免疫应答的用途

摘要

本发明公开一种来自丁酸梭菌的脂磷壁酸及其调节畜禽免疫应答的用途，先配制成质量百分比为1.5-2.5％的TX-114溶液备用；然后取8-16mL经45-50h培养的丁酸梭菌液离心分层得到菌体湿重；加入TX-114溶液离心得到脂磷壁酸的粗提取物；然后在DEAE-纤维素层析柱上过柱得到脂磷壁酸。本发明具有能够改善畜禽的肠道免疫功能，抑制病原菌在肠粘膜细胞表面的粘附定植，降低肠道传染病发病率，提高畜禽养殖业经济效益的优点。

主权项

一种来自丁酸梭菌的脂磷壁酸，其特征在于：该脂磷壁酸为由如下制备步骤制备而成的脂磷壁酸：(1)向40‑60mmol/L、pH6‑7的Tris‑HCl缓冲液中加TritonX‑114，配制成质量百分比为1.5‑2.5％的TX‑114溶液，置于4℃冰箱保存，备用；(2)取8‑16mL经45‑50h培养的丁酸梭菌液于若干支质量已知的塑料离心管中，常温、4500‑5000rpm离心25‑40min，除去上层培养液后再称各管质量，计算得到菌体湿重；(3)按照步骤(2)制得的每1g湿菌添加8‑12mL步骤(1)的1.5‑2.5％％TX‑114溶液的比例混合，磁力搅拌器搅拌裂解菌体25‑40min，4℃静置过夜；然后4℃、4500‑5000rpm离心25‑40min，去除细菌碎片，收集上层提取物；提取物置于45‑50℃水浴中25‑30min，然后常温4500‑5000rpm离心25‑40min，收集上层水相，即为脂磷壁酸的粗提取物；(4)先用0.1mol/LpH4.7的醋酸铵缓冲液预平衡DEAE‑纤维素层析柱，然后向脂磷壁酸粗提取物中加入5倍其体积的0.1MpH4.7的醋酸铵缓冲液，稀释后过柱；用同一缓冲液洗脱，直到洗脱液275nm吸光度A275低于0.01，然后用1.0mol/LpH4.7醋酸铵缓冲液洗脱结合于柱上的脂磷壁酸，整个过程用试管收集洗脱液，A275监测脂磷壁酸洗脱峰；得到脂磷壁酸。