[发明专利]一种厌氧真菌乙酰酯酶活性的快速检测方法无效
| 申请号： | 201410238895.2 | 申请日： | 2014-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN104017857A | 公开（公告）日： | 2014-09-03 |
| 发明（设计）人： | 曹阳春;姚军虎;王腊梅;李宗军;孙菲菲;魏筱诗;曹志昂;王卫涛;徐秀容 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/44 | 分类号： | C12Q1/44 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 712100*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种厌氧真菌乙酰酯酶活性的快速检测方法，将待测液在离心后，取上清液测定乙酰酯酶活性，将适当稀释的上清液、p-硝基苯乙酯和甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液置于50℃预热，然后向适当稀释的上清液中加入甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液和p-硝基苯乙酯溶液于干燥洁净的96孔酶标板上，50℃反应，用全自动酶标仪检测吸光值，根据p-硝基苯的标准曲线计算乙酰酯酶活性。该方法测定乙酰酯酶活性的方法是在活性最优条件下测得，所以减少了乙酰酯酶活性测定的误差。同时能够优化厌氧真菌乙酰酯酶的活性培养条件，使得厌氧真菌分泌的乙酰酯酶活性最高，一个反应可快速且准确的测定96个检测液的乙酰酯酶活性，且较少的样品量即可检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 真菌 乙酰 活性 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种厌氧真菌乙酰酯酶活性的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将待测液在1000×g离心10min，取上清液测定乙酰酯酶活性，将适当稀释的上清液、2mM p‑硝基苯乙酯和50mM甘氨酸‑氢氧化钠缓冲溶液置于50℃预热15‑30min，然后向50μL适当稀释的上清液中加入100μL甘氨酸‑氢氧化钠缓冲溶液和50μL p‑硝基苯乙酯溶液于干燥洁净的96孔酶标板上，50℃反应15‑30min后，用全自动酶标仪在410‑420nm下检测吸光值，根据p‑硝基苯的标准曲线计算乙酰酯酶活性。
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