[发明专利]一种白秃马勃菌丝体中水溶性活性多糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种白秃马勃菌丝体中水溶性多糖的制备方法，其步骤为：将白秃马勃菌接种于固体斜面培养基，恒温培养，得斜面种子；取培养后的斜面接种到一级液体种子培养基中培养；将培养后的一级液体种子接种到二级液体种子中培养；将培养后的二级液体种子接种发酵；将菌丝体与发酵液分离，清水冲净，烘干后研磨得到菌丝体干粉；将菌丝体干粉进行浸提或超声浸提，浓缩液体，加入乙醇沉淀收集白秃马勃菌水溶性活性多糖粗沉淀物，将多糖粗沉淀物用热水溶解，除去游离蛋白质以及小分子杂质，浓缩，加入乙醇沉淀，经干燥得到白秃马勃菌水溶性活性多糖精制提取物。本发明方法易行，制备操作简便，低温、短时、高效。

主权项

一种白秃马勃菌丝体的培养方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将白秃马勃菌接种于PDA固体斜面培养基，于26℃恒温培养5～7天，得到斜面种子；所述的PDA固体斜面培养基包含如下质量百分含量组分：马铃薯18～22%，葡萄糖1.0～3.0%，酵母粉1.0～2.0%，蛋白胨0.5～0.7%，七水硫酸锌0.01～0.03%，七水硫酸镁0.04～0.07%，磷酸二氢钾0.05～0.15%，琼脂粉1.0～2.0%，余量为水；（2）取上述斜面种子接种到装有一级液体种子培养基的三角瓶中，加入玻璃珠，于26℃、130r/min培养72～96小时；所述的一级液体种子培养基包含如下质量百分含量组分：玉米粉3.0～5.0%，葡萄糖1.0～2.0%，黄豆粉1.0～2.5%，蛋白胨1.5～3.0%，酵母粉1.5～2.5%，七水硫酸镁1.0～2.5%，七水硫酸锌0.1～0.3%，磷酸二氢钾1.5～2.5%，余量为水；（3）将培养72～96小时后的一级液体种子接种到装有二级液体种子培养基的三角瓶中，加入玻璃珠，于26℃、150r/min培养60～72小时；所述的二级液体种子培养基与一级液体种子培养基相同；（4）将培养60～72小时后的二级液体种子接种到装有发酵培养基A的三角瓶中，于28℃、180r/min培养96小时；所述的发酵培养基A包含如下质量百分含量组分：马铃薯20～30%，蔗糖2.0～4.0%，蛋白胨0.6～1.2%，七水硫酸镁0.2～0.6%，磷酸二氢钾0.3～0.6%，碳酸钙0.2～0.6%，余量为水；（5）将菌丝体与发酵液分离，用水冲洗干净，烘干后得到白秃马勃菌丝体。